流行毒株毒性更强了！要彻底控制伪狂犬只有一个办法
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疫经典伪狂犬疫苗的阴性场在短时间内转阳？研究表明，流行毒株的致病力更强，其免疫保护相关基因的也发生了改变。想要彻底控制伪狂犬只有一个办法，就是把病毒从猪群中清除，即净化。那么，如今净化伪狂犬该怎么做？
流行毒株疫苗免疫伪狂犬保护力更强，关键原理是这个
自2011年起，伪狂犬病毒在我国发生了变异，许多免疫经典伪狂犬疫苗的阴性场在短时间内转阳，不仅给养猪业带来了较大损失，也为伪狂犬病的净化带来新的困难。
流行毒株的致病力更强
猪只随着年龄的增长对伪狂犬病毒的敏感性降低，所以通常来说伪狂犬病毒主要危害小猪。伪狂犬病毒通常经由鼻腔接触感染，通过呼吸道上皮细胞扩散到临近的神经细胞，然后上传到大脑，因此小猪会表现出神经症状。
虽然大猪对伪狂犬病毒不敏感，但伪狂犬病毒感染后会在猪体内终身存在，其潜伏于三叉神经节或者扁桃体中且无法被清除，遇到应激或在免疫抑制状态下，病毒就会被重新激活复制，然后排毒，从而在猪场中再次引起发病，反复循环。
想要彻底控制只有一个办法，就是把病毒从猪群中清除，即净化。使用伪狂犬疫苗免疫虽然不能根除和消灭病毒，但可以降低自然感染率和阻断排毒，保护猪只免于发病。目前针对伪狂犬病拥有效果稳定的gE基因缺失疫苗，可以实现野毒与疫苗毒的鉴别诊断，是做净化的有力武器。
但自2011年随着伪狂犬病毒发生变异，情况与此前开始有了不同。一些免疫较好的、甚至实现净化的猪场发生母猪流产和产死胎，仔猪出现神经症状，短时间内gE抗体出转阳，转阳率高达70%。
研究显示，变异毒株对猪的致病力变得更强，用分离的变异毒株对小猪进行滴鼻，第5天即全部死亡，肌注接种11天左右全部死亡。实验室使用102TCID50流行毒株接种14日龄仔猪可导致80%的猪死亡，而使用经典伪狂犬强毒以104TCID50剂量接种，仅导致40%死亡；使用105TCID50流行毒株感染1月龄仔猪，导致100%死亡，感染2月龄猪只导致40%死亡，而使用经典强毒106TCID50剂量感染1月龄仔猪导致80%死亡，感染2月龄基本不死亡。
可见变异毒株的致死剂量更低，而发病日龄变得更大。相应的，临床上也证实由流行毒株伪狂犬病毒引起的中大猪死亡的案例。专家指出毒力的增强是新的流行毒株可以在已免疫的猪群中引起发病的原因之一。
gB基因变异是保护力改变的关键
虽然伪狂犬病毒仅有一个血清型，但是变异毒株形成了新的基因型。
我们知道伪狂犬病毒TK、gE和gI基因是主要的毒力基因，gB、gG、gC基因与免疫保护相关，研究人员认为当前伪狂犬病毒的gE、gB等基因发生了变异。通过对近年来分离的变异毒株的基因序列分析表明，变异毒株均有在gE蛋白的第48位和第492位各存在1个天冬氨酸插入的特征；同时gD基因、gI基因和gB基因分别有不同数量氨基酸的插入和缺失。不同地区分离的变异株之间遗传差异较小。
运用Crisp-cas9技术，将变异毒株与Bartha-K61的gB基因互换，再使用Bartha-k61的高免血清对两个重组病毒进行交叉中和实验，结果显示，Bartha株对含有变异株gB基因的重组Bartha株病毒中和指数降低，而对转换成Bartha株gB基因的变异株病毒中和指数上升。指示gB基因是造成经典疫苗毒保护力出现差异的关键。而进一步将两个重组病毒灭活制成灭活疫苗，在鼠上进行实验，显示使用流行毒制备的疫苗对流行毒的攻毒保护效力更高。
为了更好地防控在我国流行的伪狂犬病，2012年以来多个科研机构及动保企业展开了对变异株伪狂犬疫苗的研发，至今部分机构已经取得了一定成果。其中普莱柯生物工程股份有限公司猪伪狂犬变异毒株gE缺失基因工程灭活疫苗（HN1201-△gE株）——“普伪净”已经于今年1月获得新兽药证书，将成为首个推向市场的变异株伪狂犬疫苗。
据悉，该疫苗毒株是从自主分离获得的猪伪狂犬病流行株中，优选出一株细胞适应性好、致病力强、免疫原性好的HN1201株，采用基因工程技术缺失gE基因制成，其抗原含量高（灭活之前不低于108.5TCID50），猪只免疫接种后可产生高水平的中和抗体。同时，作为一款基因缺失灭活疫苗，其有利于鉴别诊断，在变异株流行的环境下，为猪场实现伪狂犬病净化提供更多选择。
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